Visualización de muestras histológicas e identificación de estructuras al Microscopio Óptico
Autor: Francisco Javier Berastegui Guigou
Tras la asistencia las clases de prácticas y la visualización de las muestras al microscopio óptico complete el siguiente informe de prácticas.
1. Identifique las partes más importantes de un microscopio óptico:(1) (0,5 puntos)
- Ocular: Es la lente por la que se observa la imagen ampliada de la muestra. Puede ser monocular o binocula.
- Brazo: Es la pieza que sostiene el tubo y el revólver. Sirve para transportar el microscopio y mantener los elementos ópticos alineados.
- Objetivo: Es el conjunto de lentes que se enrosca en el revólver. Cada objetivo tiene un aumento distinto y se puede seleccionar girando el revólve.
- Platina: Es la superficie plana donde se coloca la muestra. Tiene un orificio por el que pasa la luz del foco o la lámpara. Se puede mover verticalmente con los tornillos macrométrico y micrométrico para enfocar la imagen.
- Regulador óptico (macrométrico y micrométrico): Son dos tornillos que permiten ajustar la distancia entre la platina y el objetivo. El macrométrico hace un movimiento rápido y el micrométrico hace un movimiento fino.
- Base: Es la parte inferior del microscopio que lo soporta y le da estabilidad. Suele tener forma rectangular o de Y.
- Foco o lámpara: Es el elemento que genera un haz de luz que se dirige hacia la muestra. Puede estar debajo de la platina (en microscopios de luz transmitida) o encima de ella (en microscopios de luz reflejada).
Indique los pasos que hay que seguir para la correcta visualización de una muestra al microscopio óptico: (1 puntos)
- Conectar el microscopio a un tomacorriente y encender el iluminador o el foco. Si el microscopio tiene un espejo, orientarlo hacia una fuente de luz natural.
- Colocar el portaobjetos con la muestra sobre la platina y fijarlo con los clips de metal. Centrar la muestra sobre el orificio de entrada de luz.
- Seleccionar el objetivo de menor aumento (el más corto) y girar el revólver hasta que haga clic en su lugar.
- Girar la perilla de ajuste grueso o macrométrico hasta que el objetivo esté lo más cerca posible de la muestra sin tocarla.
- Mirar por el ocular y girar la perilla de ajuste fino o micrométrico hasta que la imagen se vea nítida y enfocada.
- Si se desea aumentar el aumento, girar el revólver hasta seleccionar otro objetivo y repetir el paso 5. No usar la perilla de ajuste grueso o macrométrico con los objetivos de mayor aumento para evitar dañar la muestra o el objetivo.
- Para mover la muestra, usar los mandos de la platina mecánica o mover el portaobjetos con cuidado con los dedos.
- Para regular la intensidad de la luz, usar el diafragma o el condensador. Evitar usar una luz demasiado fuerte que pueda dañar la muestra o los ojos.
- Cuando se termine la observación, apagar el microscopio y desconectarlo del tomacorriente. Retirar el portaobjetos de la platina y limpiar el objetivo con un paño suave o un papel de filtro. Guardar el microscopio en un lugar seguro y seco.
Dibuje o fotografíe las muestras indicadas y conteste las preguntas que se indican para cada una de las prácticas realizadas.
PRÁCTICA 1: 3,25 puntos
Muestra 1 – Intestino delgado (1 puntos)
- Adjunte la imagen de la muestra, indicando el epitelio cilíndrico simple, las microvellosidades, las células caliciformes, el tejido conjuntivo laxo y la capa de músculo liso.
- ¿Es posible visualizar el tejido conectivo?
Microvellosidades
Las microvellosidades son proyecciones cilíndricas del intestino delgado que poseen una estructura hexagonal. Están formadas por filamentos de actina que les dan estabilidad y están cubiertas por una capa de glicoproteínas y glicolípidos que les permite proteger y reconocer células. Las microvellosidades favorecen la absorción de nutrientes en el intestino delgado.
Aunque es muy complicado ver estas estructuras con claridad, con la lente de máximo aumento en el microscopio óptico se puede apreciar en cierto modo su forma cilíndrica y su disposición hexagonal.
Las células caliciformes
Las células caliciformes son células que producen moco para proteger el intestino. Se ven de color violeta porque se han teñido con una sustancia que resalta su contenido mucoso. Las células caliciformes son muy pequeñas y se necesitan objetivos de gran aumento para observarlas con el microscopio óptico.
Se encuentran dispersas entre las otras células epiteliales, que se ven de color más rosa.
El tejido conjuntivo laxo
Con el microscopio óptico, se puede observar el tejido conjuntivo laxo con diferentes aumentos, dependiendo del nivel de detalle que se quiera ver. Se pueden distinguir las diferentes células que componen el tejido y las diferentes fibras que forman la matriz extracelular, como las fibras de colágeno, elásticas y reticulares.
La capa de músculo liso
La ilustración muestra una sección transversal del intestino delgado, que consta de cuatro capas con funciones específicas: la mucosa, la submucosa, la muscularis externa y la serosa. La mucosa tiene epitelio cilíndrico simple con microvellosidades, la submucosa es tejido conjuntivo denso e irregular, la muscularis externa es una capa de músculo liso y la serosa cubre el órgano y lo separa de la cavidad abdominal.
¿Es posible visualizar el tejido conectivo?
Se puede ver el tejido conectivo con el microscopio óptico, se puede observar el tejido conectivo con diferentes aumentos, dependiendo del nivel de detalle que se quiera ver. Con diferentes aumentos, se pueden apreciar las características del tejido, como la distribución general, las células y las fibras de la matriz extracelular.
Muestra 2 – Tejido epitelial con folículo piloso (1 puntos)
- Adjunte la imagen de la muestra, indicando la epidermis, la dermis, folículo piloso, glándula sudorípara y la hipodermis.
- ¿Es posible visualizar el músculo erector del pelo?
La epidermis y la dermis
La piel está compuesta por dos capas principales: la epidermis y la dermis. La primera está compuesta por células queratinizadas y se renueva continuamente, mientras que la segunda está compuesta por tejido conjuntivo con fibras, vasos sanguíneos, nervios y glándulas.
Para su observación hemos utilizado un microscopio óptico y la coloración del tejido con pigmentos para destacar las células y las fibras. La imagen presentada representa la muestra con ambas capas, siendo la capa más superficial la más oscura y la más profunda la más clara. La parte más externa es una capa de queratina.
Folículo piloso
Tiene forma de tubo que se extiende desde la superficie de la piel hasta la dermis profunda. Está formado por varias partes, como el bulbo, la papila dérmica, el canal folicular, el músculo erector y las glándulas sebáceas y sudoríparas. Una de las imagenes mas destacada es la siguiente:
Glándula sudorípara
En esta imagen, se ven como tubos enrollados y rectos que están en la dermis o en la hipodermis. Parace en la imagen como roturas redondas sobre el tegido rosa semiuniforme.
Hipodermis
En esta capa se ve una capa de células redondas y grandes que contienen grasa, rodeadas por fibras de colágeno. Estas células se llaman adipocitos y se ven de color claro.
¿Es posible visualizar el músculo erector del pelo?
Las fibras paralelas y oscuras en la imagen son las fibras erectoras del pelo, que forman parte del músculo erector del pelo. Este músculo es un vestigio evolutivo y regula la temperatura corporal al contraerse y hacer que el pelo se erice en situaciones de frío o miedo. La voz pasiva se usa comúnmente en textos científicos y técnicos para lograr claridad y objetividad en la exposición del tema.
Muestras adicionales S1 – Identifique los siguientes epitelios y aporte las evidencias gráficas y descriptivas que apoyan su elección (1,25 puntos)
- Adjunte la imagen de la muestra, indicando el tipo de epitelio (cúbico simple, cilíndrico, estratificado y glandular)
- Argumente la clasificación
Transiciones epitelio
Este tejido se llama epitelio transicional o urotelial. Su capacidad de cambiar de forma permite que los órganos en los que se encuentra puedan expandirse y contraerse de manera efectiva sin romperse:
- En la vejiga urinaria, por ejemplo, el epitelio transicional permite que la vejiga se expanda a medida que se llena de orina y se contraiga cuando se vacía.
- En el útero, el tejido ayuda a acomodar el crecimiento del feto durante el embarazo.
- En el tracto respiratorio, el epitelio transicional ayuda a los bronquios a expandirse y contraerse con cada respiración.
En general, este tipo de tejido es esencial para el correcto funcionamiento de muchos órganos del cuerpo humano.
Tejido glandular
El tejido glandular es fundamental en el cuerpo humano, produciendo y secretando sustancias como hormonas, enzimas y moco. Hay dos tipos principales: exocrino y endocrino.
- El exocrino secreta sustancias en una cavidad externa al cuerpo.
- El endocrino secreta sustancias directamente en la sangre.
Epitelio estratificado
El epitelio estratificado es un tejido con varias capas de células que protege de daños mecánicos, químicos y biológicos, además de tener funciones de absorción, secreción y sensación. Se encuentra en diferentes partes del cuerpo, como la piel, la mucosa oral y la vagina, entre otros. Cada uno de ellos posee una especialización y una función específica.
El epitelio estratificado se ve en las fotos tomadas con el microscopio de las prácticas como una capa de células apiladas, con diferentes formas y tamaños según el tipo de epitelio. La capa más superficial es la que está en contacto con el ambiente externo o interno, y la capa más profunda es la que está en contacto con la membrana basal. Las células se renuevan constantemente desde la capa basal hacia la superficie.
El epitelio cilíndrico simple
El epitelio cilíndrico simple es un tejido epitelial conformado por una capa de células alargadas y cilíndricas que se encuentra en el estómago, intestino delgado, vesícula biliar y trompas de Falopio. Cumple funciones como la absorción de nutrientes, la síntesis de enzimas y la secreción de moco.
La presencia de microvellosidades o cilios en la superficie de las células aumenta la superficie de absorción o mueve el moco, respectivamente. Este tejido permite una rápida difusión de las sustancias a través del tejido.
Como se puede apreciar en la imagen del epitelio cilíndrico simple, vemos capa de células alargadas y delgadas con núcleos ovalados cerca de la membrana basal (parte más violeta oscuro). Estas células tienen cilios o microvellosidades en su superficie apical, que son proyecciones que ayudan al movimiento o absorción. Los cilios son más largos y visibles que las microvellosidades, que forman un borde de cepillo oscuro.
Epitelio cúbico simple
El epitelio cúbico simple es un tipo de tejido compuesto por células de forma cúbica que se organizan en una sola capa. Su función principal es la protección, secreción, absorción y la regulación de la temperatura. Se localizan en diferentes partes del cuerpo, como los pulmones, los riñones, las glándulas sudoríparas, los vasos sanguíneos y las glándulas.
El epitelio cúbico simple se vería como una capa de células con forma de cubo, con núcleos redondos en el centro. Estas células pueden tener microvellosidades o cilios en su superficie, que son proyecciones que ayudan a la absorción o el movimiento.
PRÁCTICA 2: (2,75 puntos)
Muestra 3 – Preparación histológica extensión sanguínea (1 puntos)
- Adjunte la imagen de la muestra, indicando las células que puedes observar (plaquetas, hematíes, eosinófilo, neutrófilo y linfocito). En caso de no observarse con claridad alguno de los tipos celulares, aportar imágenes obtenidas de internet citando la fuente.
- ¿Cuál es el tipo celular que se encuentra en mayor abundancia?
Plaquetas
Las plaquetas son unas células sanguíneas que se encargan de la coagulación de la sangre, es decir, de formar un tapón o coágulo cuando hay una herida o lesión en los vasos sanguíneos.
En esta imagen se puede apreciar como formas más pequeñas que los eritrocitos y los leucocitos, con un color púrpura o rojo.
Hematíes
Los hematíes, también conocidos como glóbulos rojos o eritrocitos, transportan oxígeno y dióxido de carbono en el cuerpo gracias a la hemoglobina, una proteína rica en hierro que les da su característico color rojo.
Los hematíes se verían como discos bicóncavos de color rojo, debido a la hemoglobina que contienen. Debido a que no tenemos un aumento tal para ver esa biconcavidad se supone que los puntos más pequeños y oscuros son los eritrocitos.
Eosinófilo
Los eosinófilos son un tipo de glóbulo blanco que participan en la defensa del organismo contra las infecciones parasitarias, las reacciones alérgicas y otras enfermedades.
Los eosinófilos se ven como células redondeadas con gránulos rojizos que se distribuyen entre los glóbulos rojos y otros leucocitos.
Neutrófilo
Los neutrófilos son un tipo de glóbulo blanco que se encargan de la defensa del organismo contra las infecciones bacterianas y fúngicas. Son el tipo más abundante de leucocitos en la sangre y se producen en la médula ósea.
Los neutrófilos son los más redondos y abundantes de los leucocitos, y se ven de color rosa debido a los tintes aplicados a la muestra.
Linfocito
Los linfocitos son un tipo de glóbulo blanco que se encargan de la defensa del organismo contra los agentes extraños o infecciosos. Se producen en la médula ósea y en los órganos linfoides, como el timo, el bazo, los ganglios linfáticos y las amígdalas.
Los linfocitos se ven como células redondeadas con un gran núcleo esférico que ocupa casi todo el citoplasma. El núcleo se tiñe de color violeta-azul y el citoplasma se ve como un anillo periférico de color rosa más claro. Cabe destacar la poca presencia de estos en las muestras.
¿Cuál es el tipo celular que se encuentra en mayor abundancia?
El tipo celular que se encuentra en mayor abundancia en una extensión sanguínea son los glóbulos rojos, también llamados eritrocitos o hematíes. Estas células se encargan de transportar el oxígeno y el dióxido de carbono por todo el cuerpo.
Muestras 4 y 5 – Preparación histológica de hueso compacto (hay 2 muestras: muestra 4-desgastado y muestra 5, bajo petición) (1 puntos)
- Adjunte una imagen de la muestra indicando: la osteona, las lagunas osteocíticas, el canal de Havers y las laminillas intersticiales.
- ¿Es posible visualizar los osteocitos?
La osteona
La osteona es la unidad funcional del tejido óseo compacto, formada por varias laminillas concéntricas que rodean a un canal central.
La osteona es una estructura cilíndrica que se ve como un anillo con un hueco central al microscopio óptico. El hueco central es el canal de Havers, por donde pasan los vasos sanguíneos y nervios que nutren el hueso. Alrededor del canal hay varias capas concéntricas de tejido óseo, llamadas laminillas.
Las lagunas osteocíticas
Las lagunas osteocíticas son los espacios donde se alojan los osteocitos, que son las células óseas maduras. Las lagunas se encuentran entre las laminillas óseas, que son capas concéntricas de tejido óseo que forman la osteona.
El canal de Havers
El canal de Havers es el conducto central que se encuentra en el interior de la osteona, la unidad funcional del tejido óseo compacto. Por el canal de Havers pasan los vasos sanguíneos y nervios que nutren e inervan el hueso.
En la imagen se ve como un hueco circular en el centro de la osteona, que es la unidad funcional del hueso compacto.
Las laminillas intersticiales
Las laminillas intersticiales son capas de tejido óseo que se encuentran entre las osteonas.
Las laminillas intersticiales son capas de tejido óseo que se encuentran entre las osteonas. se forman a partir de restos de osteonas antiguas que han sido parcialmente destruidas por el proceso de remodelación ósea.
¿Es posible visualizar los osteocitos?
No es posible ver los osteocitos, pero si se sabe donde estan. Los osteocitos se alojan en las lagunas osteocíticas.
Muestras adicionales S2 – Identifique los siguientes tejidos y aporte las evidencias gráficas y descriptivas que apoyan la elección (0,75 puntos)
A — cartílago elástico
El cartílago elástico es un tejido presente en varias partes del cuerpo humano que cuenta con fibras elásticas que se encargan de resistir y recuperarse de la deformación. Los componentes del cartílago elástico incluyen condrocitos, matriz extracelular, fibras elásticas y pericondrio.
En la muestra tomada en clase se ve resaltada la capa de tejido conectivo que rodea al cartílago llamada pericondrio, las lagunas donde residen las células que forman el cartílago llamadas condrocitos. También se destacan las fibras elásticas responsables de la flexibilidad y resistencia del cartílago y la matriz extracelular compuesta por colágeno tipo II y proteoglicanos que rellena el espacio entre los condrocitos y las fibras elásticas.
B — Fibrocartílago
El fibrocartílago es un tejido denso y organizado con bandas alternas de colágeno y condrocitos, que son las características distintivas del fibrocartílago. Los condrocitos se encuentran en lagunas rodeados por la matriz ósea y los fibroblastos están entre las fibras de colágeno produciendo la matriz extracelular.
Las bandas de colágeno se ven como franjas oscuras y gruesas, debido a la alta densidad de fibras de colágeno tipo I. Las bandas de condrocitos se ven como franjas claras y delgadas, debido a la menor cantidad de fibras de colágeno tipo II.
PRÁCTICA 3: 2,5 puntos
Muestra 6 – Preparación histológica de músculo cardíaco (1 punto)
- Adjunte la imagen de la muestra, indicando, los discos intercalares, las ramificaciones de las fibras cardíacas y los núcleos de las células
- ¿Qué son los discos intercalares?
Los discos intercalares
Los discos intercalares se ven como líneas transversales más oscuras que atraviesan las fibras musculares cardíacas, que son cilíndricas, ramificadas y estriadas.
Las ramificaciones de las fibras cardíacas
Las ramificaciones de las fibras cardíacas se ven como líneas oblicuas o curvas que atraviesan las fibras, que tienen un aspecto estriado debido a la disposición de los miofilamentos.
Los núcleos de las células
Los núcleos de las células del músculo cardíaco se ven como estructuras ovaladas, pálidas y centrales en las fibras musculares.
¿Qué son los discos intercalares?
Como ya me referí antes, los discos intercalares son estructuras que unen las células del músculo cardíaco entre sí, permitiendo la transmisión de los impulsos eléctricos y mecánicos que coordinan la contracción del corazón.
Muestra 7 – Preparación histológica de músculo esquelético (1 puntos)
- Corte longitudinal
- Adjunte la imagen de la muestra indicando las estriaciones, los núcleos periféricos indicando si son de células satélite o de fibras musculares, y el epimisio
- Corte transversal
- Adjunte la imagen de la muestra indicando los fascículos, núcleos periféricos y las miofibrillas.
- ¿Por qué no podemos observar las estriaciones típicas de este tipo de tejido muscular?
Los núcleos periféricos indicando si son de células satélite o de fibras musculares
Los núcleos periféricos son los que están al borde de las células del músculo. Hay dos tipos de células: las fibras musculares y las células satélite.
- Las fibras musculares son las que hacen el trabajo del músculo, son grandes y claros.
- Las células satélite son las que ayudan a reparar el músculo, son pequeños y oscuros.
En mi opinión la muestra se ve claramente que los nucles son pequeños y oscuros lo que me hace pensar que se refiere a una celula satelite encargada de reparación muscular.
El epimisio
El epimisio se ve como una banda densa y clara que delimita el contorno del músculo. Esta banda es una composición de fibras de colágeno tipo I y algunas células.
En la muestra sería como ese gel esponjoso rosa que delimita la muestra longitudinal.
Los fascículos
En los fascículos musculares se observan las fibras musculares individuales, que tienen bandas claras y oscuras alternadas correspondientes a los sarcómeros. Los sarcómeros están formados por filamentos de actina y miosina, que son las proteínas contráctiles.
Cada fascículo se ve de color rosa y tiene puntos negros que son los núcleos de las fibras musculares. Dentro de cada fascículo se pueden distinguir las bandas claras y oscuras de las miofibrillas. La banda clara es la banda I y la banda oscura es la banda A.
¿Por qué no podemos observar las estriaciones típicas de este tipo de tejido muscular?
Se requiere un aumento significativo, generalmente el cuarto nivel, para observar detalladamente estructuras anatómicas en microscopios. Aunque existe una imagen que muestra esta estructura, solo se puede apreciar ligeramente y se necesita un aumento mayor para mejorar la visualización y descripción.
Muestra adicional S3 – Identifique e siguientes tejido y aporte las evidencias gráficas y descriptivas que apoyan la elección (0,5 puntos)
Adjunte la imagen de la muestra, indicando el tejido principal que se observa e identifique, si es posible, el subtipo del que se trata
Tejido adiposo blanco
El tejido adiposo blanco es un tipo de tejido conectivo especializado que almacena energía en forma de lípidos. Se localiza en el tejido subcutáneo, entre las células adipocitos, y tiene dos tipos de adipocitos: unilocular y multilocular.
La figura denota una serie de cuadrados de pequeñas dimensiones que ilustran secciones de tejido. Los anillos claros indican la presencia de adipocitos uniloculares, los cuales se tiñen de rosa. Por otro lado, los adipocitos multiloculares, de menor tamaño y forma redondeada, se tiñen de morado. Los espacios que se encuentran entre las células contienen tejido conectivo, vasos sanguíneos y nervios.
Conclusión
En este proyecto, se ha realizado un estudio práctico sobre los diferentes tipos de tejidos mediante el uso del microscopio óptico como herramienta de observación. Se han evaluado tanto las características morfológicas como las funcionales de los tejidos.
Además, se han identificado los componentes celulares y extracelulares que componen los tejidos. Este análisis destaca la relevancia de la biología tisular para comprender la estructura y función de los tejidos.
Referencias
(1) Las Partes del Microscopio Óptico y sus Funciones. (2020, April 7). Lifeder. https://www.lifeder.com/partes-microscopio-optico/